一、植物细胞培养实验室设置
1.基本实验室
1.1 洗涤间 根据工作量的大小决定其大小,一般面积控制在30-50m2。在实验室的一侧设置专用的洗涤水槽,用来清洗玻璃器皿。中央实验台还应配置2个水槽,用于清洗小型玻璃器皿。如果工作量大,可以购置一台洗瓶机。准备1-2个洗液缸,专门用于洗涤对洁净度要求很高的玻璃器皿。此外还应配置落水架、干燥箱、柜子、超声波清洗器等。 地面应耐湿并排水良好。
1.2培养基配制间 面积60平方米左右,配备的主要仪器设备有 :冰箱、天平、微波炉、pH计、培养基分装器、药品柜、器械柜、抽气泵、电炉、各种规格的培养瓶、培养皿、移液管、烧杯、量筒、容量瓶、储藏瓶等。冰箱以体积180-200L为宜,用于储存培养基母液、激素维生素等贵重药品、彩色胶卷、及保存植物材料。天平应有不同感量。
1.3消毒间 配备实验台、高压灭菌锅、排风灭火设备、细菌过滤设备、干热消毒柜、电炉等。
灭菌锅的选择应根据不同的要求选择不同型号的灭菌锅。一般实验室可选用小型的医用手提式高压灭菌锅,较大的实验室可选用立式自动控制压力和温度的灭菌锅。生产性的实验室可选用大型的卧式灭菌锅。
如果没有条件的话,可以将上述工作间合并成一个准备间,要求是设备的安装和排列要合理、房间要宽敞、明亮、透风,地面要便于清洁、防滑。
1.4无菌操作室 无菌操作室主要用于实验材料的接种操作,所以又叫接种室。通常由里外两间组成,外间是缓冲间,用于准备工作,还有防止污染的作用。缓冲间的门应该与接种室的门错开,两个门也不要同时开启,以保证无菌室不因开门和人的进出带进杂菌。
缓冲间内应该设有水槽、实验台、鞋帽架、和柜子、紫外灯。无菌操作室的内壁应当用塑钢板或瓷砖装修,工作人员进入操作间前要穿上消过毒的工作服和拖鞋。
室内应配有超净工作台,紫外灯、解剖镜、各种接种器械等。
1.5培养室 为了控制培养室的温度和光照时间及其强度,培养室的房间不要窗户,但应当留一个通气窗,并安上排气扇。室内温度由空调控制,光照由日光灯控制。天花板和内墙最好用塑料钢板装修,地面用水磨石或瓷砖铺设,一般要分两间,一为光照培养室,一为暗培养室。培养室外应有一预备间或走廊。
培养室应配有培养架、转床、摇床、光照培养箱、生化培养箱、自动控时器等。日光灯一般用40W,固定在培养架的侧面或搁板的下面,每层有两支日光灯,距离在20cm,光照强度为2000-3000lx。
2.辅助实验室
2.1鉴定室
细胞学鉴定室 其功能是对培养材料进行细胞学鉴定和研究。要求清洁、明亮、干燥,使各种光学仪器不受潮湿和灰尘污染。应配置各种显微镜、照相系统等。
生化分析室 在以培养细胞产物为主要目的的实验室中,应建立相应的分析化验实验室,以便于对培养物的有效成分随时进行取样检查。 离心机、酶联免疫检测仪、天平、PCR仪等。
2.2、温 室 用于试管苗的锻炼和移植,为试管苗提供满足生长的适宜环境条件。
常用设备有:温室 、弥雾装置、荫棚、移栽床、钵、盆、基质等.
二、动物细胞培养实验室设置
无菌条件:净化工作室,风淋室,传递窗,高效过滤器,洁净层流罩,生物安全柜,超净工作台,紫外灯,电热干燥箱,滤器,高压灭菌器,抗生素
细胞生长条件:纯水蒸馏器,纯水仪,培养板,培养瓶, CO2培养箱,培养基,血清
细胞检测条件:倒置显微镜,酶标仪 ,微孔板震荡器,高速离心机,移液器
细胞保存条件:液氮罐
实验室
准备间
缓冲间
培养室
实验室的要求
①和缓冲间相连,缓冲间内备消毒服装和鞋,口罩等,入内换上
②设置1—2台超净工作台
③室内空气不流通,有适当的光线,清洁,干燥
④侧部可设传递窗,用于物品传递
⑤照明用荧光灯为好,消毒用紫外线灯
⑥在室内工作时,动作应轻微
准备间内设备
①大、小水槽②消毒设备③消毒后的物品和器械保藏柜④烘箱⑤蒸馏器(包括双蒸,三重蒸馏水)⑥玻璃器皿,培养液等⑦电炉等
注意:
①配制溶液要用新鲜的纯水,配制过程避免交叉感染
②设备排列紧凑
③指定一处可暂放不污及有毒物质
准备间设备
CO2培养箱:37度+/-0.5度;能调节温度和CO2浓度
消毒器:高压锅,蒸汽灭菌锅,干燥消毒箱
冰箱:4度或-20度家用冰箱,保存一般制剂;-70度保存蛋白制剂
水质纯化装置:净化水质用于清洗或配制培养液
另外:显微镜,离心机,酸度计,天平,液氮罐、真空泵等